云南不同产地灯盏细辛药材中灯盏乙素的HPLC测定

目的：以灯盏乙素的含量为指标来比较云南不同产地灯盏细辛药材的质量差异。方法：灯盏细辛药材经50％乙醇提取，用高效液相色谱方法（C18柱，用甲醇-乙腈-0．5％甲酸为流动相梯度洗脱）测定灯盏乙素的含量。结果：云南不同产地灯盏细辛中灯盏乙素的含量在0．72％～2．95％之间，平均含量1．40％．结论：云南不同产地灯盏细辛药材质量基本一致，以弥勒县等传统产区的药材灯盏乙素含量相对较高。     

灯盏细辛黄酮类成分对压力诱导的视网膜神经节细胞凋亡的影响

目的考察灯盏细辛中黄酮类成分(总黄酮、灯盏花素)对体外高压诱导的视网膜神经节细胞(retinal gan-glion cells,RGCs)凋亡的影响,探讨其视神经保护作用的物质基础。方法采用胰酶消化法将24只出生2~3d的SD(Sprague-Dawley)乳鼠视网膜制成细胞悬液,接种于经多聚鸟氨酸(HA)和层粘连蛋白(LN)包被的盖玻片中。培养72h后,将覆有细胞的血盖片转入加压装置中,加入黄酮类成分,继续培养48h,采用Fas蛋白免疫组化染色法及原位末端脱氧核苷酸转移酶标记(Tunel-POD)法进行检测,每天观察细胞形态,同时对部分细胞行NSE染色检查。结果细胞生长良好,NSE染色表明,85%以上的细胞为RGCs。给药组的Fas蛋白阳性表达指数和凋亡指数均明显低于模型组(P<0.05~0.01)。结论黄酮类成分均能对抗压力诱导的RGCs凋亡,为灯盏细辛视神经保护的有效组分。     

灯盏花素对大鼠脑缺血后细胞间粘附分子-1及其mRNA表达的影响

目的:灯盏花素对大鼠脑缺血后细胞间粘附分子-1(ICAM-1)及其mRNA表达的影响。方法:复制大鼠大脑中动脉闭塞/再灌注模型,应用RT-PCR及免疫组织化学的方法,观察各组大鼠脑缺血后细胞间粘附分子-1 mRNA及其蛋白的表达。结果:ICAM-1在假手术组大鼠脑组织呈低表达;单纯缺血组(缺血90 min)ICAM-1表达上调(P＜0.05);缺血再灌注组(缺血90 min再灌24 h)脑组织ICAM-1表达显著高于假手术组和单纯缺血组(P＜0.01);灯盏花素治疗组于相同时限ICAM-1表达与单纯缺血、缺血再灌注组相比显著下调(P＜0.01)。大鼠脑组织ICAM-1 mRNA在假手术组呈低表达;单纯缺血组ICAM-1 mRNA水平显著上调(P＜0.01);药物治疗组于相同时限ICAM-1 mRNA水平显著低于单纯缺血组及缺血再灌注组(P＜0.01)。结论:灯盏花素下调细胞间粘附分子-1mRNA及其蛋白的表达,减轻缺血后再灌注损伤,从而发挥脑保护作用。     

The Effect of Erigeron Breviscapus on Proliferation of Pulmonary Artery Smooth Muscle Cells in Hypoxic Porcines

Erigeron breviscapus can relax microarteries,improve microcirculation,increase tissue bloodstream,enhance heart function and decrease bloodviscosity.Presently,good curative effects on is-chemia has been achieved,but few studies have beenconducted on the treatment of hypoxic pulmonaryhypertension( HPH) .In this study,MTT and ex-pression of PCNA was used to examine the prolifera-tion of PASMC and investigate the mechanism of ef-fectof EB on HPH.1　 MATERIALSAND METHODS1 .1　 Cult…     

含灯盏花中成药DNA提取及其分子鉴定

目的:优选适用于含灯盏花中成药的DNA提取方法和聚合酶链式反应(PCR)扩增引物,并通过测序和系统发育分析实现对其原料灯盏花的分子鉴定。方法:采用4种十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)改良方法对3种含灯盏花的中成药进行DNA提取,测定DNA的纯度和浓度。采用内转录间隔区(ITS)、matK、psbA-trnH、rbcL位点通用引物对提取的中成药DNA进行PCR扩增,并对PCR扩增最佳位点进行测序,通过构建系统发育树进行分子鉴定。结果:4种CTAB改良方法均能获得含灯盏花中成药DNA,其中CTAB改良方法一提取的DNA质量浓度显著高于其他改良方法;PCR扩增中以matK位点2对引物(matKXF/matK5R或matK3F/matK1R)最佳,可通过1次PCR成功获得具有单一条带且浓度较高的PCR产物,序列与灯盏花对照药材同源性为100%,系统发育树显示可与同属其他植物区分。结论:通过CTAB改良方法一可以有效提取含灯盏花中成药样品的DNA,采用matK位点引物matKXF/matK5R或matK3F/matK1R进行1次PCR扩增并对产物进行测序,通过序列比对可完成其原料灯盏花的鉴定。     

中药灯盏细辛化学成分的研究(Ⅱ)

目的：进一步研究灯盏细辛「Ｅｒｉｇｅｒｏｎ ｂｒｅｖｉｓｃａｐｕｓ（Ｖａｎｔ．）Ｈａｎｄ．－Ｍａｚｚ．」的化学成分。方法：采用硅胶柱层析对灯盏细辛的氯仿萃取部分的化学成分进行分离和纯化,应用理化常数和光谱分析（ＩＲ,ＭＳ,＾１ＨＮＭＲ,＾１３ＣＮＭＲ）鉴定其结构。结果：得到６个单体化合物,结构分别为３,４－二羟基肉桂酸（３,４－ｄｉｈｙｄｒｏｘｙ－ｐｈｅｎｙｌ ａｃｒｙｌｉｃ ａｃｉｄ,Ⅶ）,α－甲氧基－γ－吡喃酮（α－ｍｅｔｈｏｘｙ－γ－ｐｙｒａｎｏｎｅ,Ⅷ）、豆甾醇（ｓｔｉｇｍａｓｔｅｒｏｌ,Ⅺ）、胡萝卜甙（β－ｓｉｓｔｏｓｔｅｒｏｌ－３－Ｏ－β－Ｄ－ｇｌｕｃｏｐｙｒａｎｏｓｉｄｅ,Ⅻ）。结论：化合物Ⅶ,Ⅷ,Ⅺ,Ⅻ为首次从本植物中分得。     

黄芪灯盏花注射液对阳气虚型冠心病心率变异的影响

观察黄芪灯盏花注射液对 2 5例阳气虚型冠心病患者的心率变异性(HRV)的影响 ,并设对照组及正常人组 ,采用动态心电图含有 HRV时域分析软件进行分析。结果 :黄芪灯盏花注射液组 HRV数值明显提高 ,差异显著 (P<0 .0 5 ) ,或非常显著 (P<0 .0 1)。提示 :黄芪灯盏花注射液对冠心病患者 HRV心脏自主神经功能具有益影响。     

灯盏细辛注射液体外抗菌作用及其无菌检查

目的探讨灯盏细辛注射液体外抗菌活性及其无菌检查方法.方法应用三种药物体外抗菌、抑菌实验方法,检查灯盏细辛注射液体外抗菌作用并初步确定其无菌检查方法;通过无菌验证实验方法来确定其无菌检查方法的有效性.结果灯盏细辛注射液的直接接种法无菌检查法抑菌实验显示其对金黄色葡萄球菌的强大抑制作用,直接接种法不能用于其无菌检查;进一步体外抗菌、抑菌实验显示其体外具有较强的抗菌、抑菌作用;应用薄膜过滤法对其无菌项目进行检查,无菌验证实验确定其无菌检查的有效方法为薄膜过滤法.结论灯盏细辛注射液体外对金黄色葡萄球菌的显示出强大的抑制作用,其无菌检查的有效方法为薄膜过滤法.     

灯盏花素对糖尿病大鼠肾脏氧化应激的影响

目的　在链脲菌素诱导的糖尿病大鼠模型上 ,灯盏花素与化学合成药氨基胍相比较来探讨灯盏花素对糖尿病大鼠肾脏的保护作用及与氧化应激的关系。方法　用链脲菌素诱导糖尿病大鼠模型后 ,将糖尿病大鼠分为 :糖尿病组、灯盏花素组 (0 1g·kg-1)和氨基胍组 (饮水含 1g·L-1的氨基胍 )。在给药 15～ 17wk后进行与氧化应激相关的各项实验观察。结果　① 15～ 17wk的糖尿病大鼠与正常对照组相比 :肾指数显著增加 ,肾脏的抗氧化能力显著降低且氧化应激增强。②灯盏花素组与糖尿病组相比 :肾指数显著降低 ,总抗氧化能力和肾脏超氧化物歧化酶活性显著提高 ,脂质过氧化产物丙二醛显著降低。③氨基胍组与糖尿病组相比 :肾脏超氧化物歧化酶活性显著提高 ,肾脏的脂质过氧化产物丙二醛显著性降低 ,总抗氧化能力差异无显著性。结论　糖尿病大鼠与正常大鼠相比肾脏抗氧化能力降低且氧化应激增强 ,灯盏花素可显著提高糖尿病大鼠肾脏的抗氧化能力和降低氧化应激